ATCC23624標(biāo)準(zhǔn)菌株原裝0代菌株ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株

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ATCC 菌株并不屬于任何公司,ATCC 是美國典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type Culture Collection)的縮寫,它是一家成立于 1925 年的非盈利性組織。
ATCC 的主要使命是收集、保存、鑒定和分發(fā)各種生物材料,包括微生物菌株、細(xì)胞系等,為全球的科研、工業(yè)和教育領(lǐng)域提供標(biāo)準(zhǔn)參考材料。不過,ATCC 通過授權(quán)衍生物計劃(LDP)與一些商業(yè)公司合作,這些公司可以生產(chǎn)和銷售基于 ATCC 生物材料的產(chǎn)品。目前參與該計劃的公司有 Microbiologics Inc.、PML Microbiologicals、Gibson Laboratories Inc.、MEC Conti、Remel Inc. 等。

以下是一些 ATCC 的保藏資源在藥物研發(fā)中的成功案例:
腫瘤藥物研發(fā):在研發(fā)治療肺癌的新型小分子靶向藥物時,科研人員利用 ATCC 的肺癌細(xì)胞系 A549 進(jìn)行藥物敏感性實驗。通過將不同濃度的藥物作用于 A549 細(xì)胞,觀察細(xì)胞的生長抑制情況、凋亡率變化以及相關(guān)信號通路蛋白的表達(dá)水平,以此評估藥物的療效和作用機(jī)制,為后續(xù)藥物的臨床前研究提供重要依據(jù)。
神經(jīng)退行性疾病藥物研發(fā):針對阿爾茨海默病,研究人員使用 ATCC 的神經(jīng)元細(xì)胞系,如 SH - SY5Y 細(xì)胞,建立疾病模型。通過誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生 β - 淀粉樣蛋白沉積和 tau 蛋白過度磷酸化等病理特征,篩選能夠改善這些病理變化的藥物,為尋找治療阿爾茨海默病的有效藥物提供細(xì)胞水平的實驗支持。
助力疫苗生產(chǎn)中的宿主細(xì)胞殘留檢測:在流感疫苗的生產(chǎn)過程中,通常使用 MDCK 細(xì)胞作為宿主細(xì)胞。為了確保疫苗的安全性,需要對疫苗中的殘留 MDCK 細(xì)胞基因組 DNA 進(jìn)行檢測。ATCC 與 USP 合作開發(fā)的定量 MDCK 基因組 DNA 標(biāo)準(zhǔn)品,可用于驗證定量 PCR(qPCR)檢測方法的準(zhǔn)確性和可靠性。通過將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品加入到疫苗樣品中,進(jìn)行 qPCR 檢測,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而準(zhǔn)確測定疫苗中殘留 MDCK 細(xì)胞基因組 DNA 的含量,確保其符合監(jiān)管要求。
支持生物藥生產(chǎn)中的宿主細(xì)胞殘留檢測:對于使用 HEK - 293 細(xì)胞生產(chǎn)的重組蛋白藥物,ATCC 的 HEK - 293 基因組 DNA 標(biāo)準(zhǔn)品可用于檢測藥物生產(chǎn)過程中殘留的宿主細(xì)胞 DNA。在藥物純化過程的各個階段,使用該標(biāo)準(zhǔn)品對 qPCR 檢測方法進(jìn)行校準(zhǔn)和驗證,及時監(jiān)測并控制殘留 DNA 的水平,保證生物藥的質(zhì)量和安全性。

使用 - 80℃冰箱保存 ATCC 菌株時,需要注意以下幾個方面的問題:
菌株準(zhǔn)備
菌液濃度:確保用于保存的菌株處于對數(shù)生長期,此時的菌株活力較強(qiáng)。一般來說,菌液濃度應(yīng)達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn),例如對于細(xì)菌,通常要求菌液的 OD 值(光密度)在 0.6 - 0.8 左右,以保證有足夠數(shù)量的活菌用于長期保存。
保護(hù)劑使用:添加合適的保護(hù)劑是非常關(guān)鍵的。常用的保護(hù)劑如甘油,其終濃度一般在 15% - 30% 之間。甘油濃度過高可能會對菌株產(chǎn)生毒性,過低則不能有效保護(hù)菌株免受冷凍損傷。在添加甘油時,要確保其與菌液充分混合均勻。
凍存管選擇
材質(zhì)與質(zhì)量:應(yīng)選用高質(zhì)量、耐低溫的凍存管,通常由聚丙烯等材質(zhì)制成。優(yōu)質(zhì)的凍存管具有良好的密封性和耐低溫性能,能防止在 - 80℃環(huán)境下破裂或泄漏。
規(guī)格合適:根據(jù)菌株的量選擇合適規(guī)格的凍存管,一般常用的有 1.5 mL 或 2.0 mL 的凍存管,避免使用過大或過小的凍存管,以保證菌液在管內(nèi)有合適的空間,且便于凍存和復(fù)蘇操作。
冷凍過程
緩慢降溫:為了減少冰晶對菌株細(xì)胞的損傷,應(yīng)采用緩慢降溫的方式??梢詫⒀b有菌株的凍存管先放入 - 20℃冰箱中預(yù)冷 2 - 4 小時,然后再轉(zhuǎn)移至 - 80℃冰箱。也可以使用專門的冷凍盒,如含有異丙醇的梯度冷凍盒,它能以相對均勻的速度降溫,使菌株更好地適應(yīng)低溫環(huán)境。
避免反復(fù)凍融:盡量避免對同一管菌株進(jìn)行多次凍融,因為每次凍融過程都可能對菌株造成損傷,導(dǎo)致菌株活力下降或基因突變。如果需要使用多支凍存管中的菌株,應(yīng)分別取出解凍,而不是將一支凍存管反復(fù)凍融。
冰箱維護(hù)與管理
溫度監(jiān)測:定期監(jiān)測 - 80℃冰箱的溫度,確保其溫度穩(wěn)定在 - 80℃左右,波動范圍最好控制在 ±5℃以內(nèi)??梢允褂脺囟扔涗泝x或溫度計進(jìn)行監(jiān)測,并做好記錄。如果發(fā)現(xiàn)溫度異常,應(yīng)及時查找原因并進(jìn)行修復(fù)。
定期除霜:冰箱內(nèi)的霜層會影響制冷效果,因此需要定期除霜。除霜時應(yīng)注意避免對菌株造成影響,可以將菌株暫時轉(zhuǎn)移至其他備用的 - 80℃冰箱或液氮罐中,待除霜完成、冰箱恢復(fù)正常溫度后再放回。
空間規(guī)劃:合理規(guī)劃冰箱內(nèi)的空間,將不同類型或來源的菌株分類存放,并做好標(biāo)記??梢允褂脙龃婕芑騼龃婧羞M(jìn)行整理,以便于查找和取用菌株。同時,要留出一定的空間用于空氣流通,以保證制冷效果均勻。
記錄與標(biāo)識
詳細(xì)記錄:建立詳細(xì)的菌株保存記錄,包括菌株的名稱、ATCC 編號、保存日期、保存條件、凍存管數(shù)量等信息。記錄還應(yīng)包括菌株的來源、相關(guān)的實驗記錄以及任何與菌株特性變化有關(guān)的信息,以便在需要時進(jìn)行查詢和追溯。
清晰標(biāo)識:在凍存管上用防水、耐低溫的標(biāo)記筆清晰地標(biāo)注菌株的名稱、ATCC 編號、保存日期等關(guān)鍵信息。也可以使用標(biāo)簽貼紙,但要確保貼紙在低溫環(huán)境下不會脫落或模糊。此外,還可以在凍存架或凍存盒上進(jìn)行標(biāo)識,方便快速定位所需菌株。

微生物保藏中心的資源在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,涵蓋土壤改良、作物生長促進(jìn)、病蟲害防治等方面,具體如下:
土壤改良與肥力提升
增加土壤養(yǎng)分:保藏中心的一些微生物,如根瘤菌、固氮菌等,具有固氮作用,能將空氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為植物可吸收的氮素營養(yǎng)。解磷菌、解鉀菌則可分解土壤中難溶性的磷、鉀化合物,使其轉(zhuǎn)化為植物可利用的形態(tài),增加土壤養(yǎng)分有效性,提高土壤肥力。
改善土壤結(jié)構(gòu):某些微生物在生長過程中會分泌胞外多糖等物質(zhì),這些物質(zhì)可以將土壤顆粒黏結(jié)在一起,形成穩(wěn)定的團(tuán)聚體,改善土壤的通氣性、透水性和保水性,有利于農(nóng)作物根系生長和發(fā)育。
促進(jìn)作物生長
產(chǎn)生植物生長激素:保藏的一些微生物,如芽孢桿菌、假單胞菌等,能夠產(chǎn)生生長素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等植物生長激素,促進(jìn)作物種子萌發(fā)、根系生長、植株發(fā)育,提高作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。
增強(qiáng)植物抗逆性:部分微生物可誘導(dǎo)植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗性,增強(qiáng)植物對干旱、高溫、低溫等逆境條件的適應(yīng)能力。例如,一些叢枝菌根真菌能夠與植物根系形成共生體,幫助植物吸收更多的水分和養(yǎng)分,提高植物在干旱條件下的生存能力。
病蟲害防治
拮抗病原微生物:微生物保藏中心有許多具有拮抗作用的微生物,如木霉菌、鏈霉菌等,它們可以通過分泌抗生素、酶類等物質(zhì)抑制或殺死植物病原微生物,減少病蟲害的發(fā)生。
誘導(dǎo)植物抗病性:一些有益微生物可以激活植物自身的免疫系統(tǒng),使植物產(chǎn)生抗病性。例如,用熒光假單胞菌處理植物種子或根系,可誘導(dǎo)植物產(chǎn)生對多種病原菌的抗性,降低病害發(fā)生率。
農(nóng)產(chǎn)品保鮮與加工
生物保鮮:某些微生物產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)可用于農(nóng)產(chǎn)品的生物保鮮。例如,乳酸菌產(chǎn)生的細(xì)菌素具有抑制腐敗菌和病原菌的作用,將其應(yīng)用于水果、蔬菜、肉類等農(nóng)產(chǎn)品的保鮮,可延長農(nóng)產(chǎn)品的貨架期。
食品發(fā)酵:在農(nóng)產(chǎn)品加工中,微生物保藏中心的多種微生物菌株被廣泛用于發(fā)酵過程,如釀酒酵母用于酒類發(fā)酵,乳酸菌用于酸奶、泡菜等發(fā)酵食品的生產(chǎn),這些微生物不僅能改善食品的風(fēng)味和品質(zhì),還能提高食品的營養(yǎng)價值和保存性。

美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)的發(fā)展歷程如下:
起源與成立:其前身可追溯至 1921 年,當(dāng)時美國陸軍醫(yī)學(xué)博物館接收了著名的溫斯洛培養(yǎng)物收藏,該收藏由美國細(xì)菌學(xué)家協(xié)會的華盛頓特區(qū)成員負(fù)責(zé)照料。1925 年,ATCC 正式成立,成為一個官方實體,當(dāng)時保藏的培養(yǎng)物被轉(zhuǎn)移到芝加哥的麥考密克研究所。
早期發(fā)展:1937 年,培養(yǎng)物又遷回華盛頓,隨著收藏的培養(yǎng)物不斷增加和多樣化,空間逐漸變得緊張,ATCC 經(jīng)歷了一系列搬遷,以尋找更大的場地來容納不斷增長的生物資源。
中期發(fā)展:在成立后的幾十年里,ATCC 主要依賴政府資金維持運(yùn)營。它逐漸發(fā)展成為世界上最大的生物資源中心,保藏的生物材料涵蓋細(xì)菌、真菌、病毒、細(xì)胞系等多種類型。1981 年,ATCC 有 39,000 多培養(yǎng)物發(fā)放給全世界的科學(xué)工作者,并成功地用冷凍和冷凍干燥的方法保存各種細(xì)胞品系。
現(xiàn)代轉(zhuǎn)型:1993 年,雷蒙德?賽普斯擔(dān)任 ATCC 的負(fù)責(zé)人,他致力于重振該組織,提升其在生物科學(xué)領(lǐng)域的知名度,并大力倡導(dǎo)生物研究的標(biāo)準(zhǔn)制定。在他的領(lǐng)導(dǎo)下,ATCC 從一個單純的非營利性保藏機(jī)構(gòu)轉(zhuǎn)變?yōu)橥苿由锟茖W(xué)發(fā)展的重要資源中心。到 21 世紀(jì) 10 年代,ATCC 已成功實現(xiàn)轉(zhuǎn)型,在生物科學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
設(shè)施與合作:如今,ATCC 總部位于弗吉尼亞州馬納薩斯,擁有一座 126,000 平方英尺的建筑,其中包括 18,000 平方英尺的生物材料保藏庫和 35,000 平方英尺的實驗室空間。ATCC 還與全球多個國際培養(yǎng)物保藏中心建立了合作關(guān)系,如英國的國家植物病原菌收集中心、比利時的微生物協(xié)調(diào)收集中心、德國微生物菌種保藏中心、日本生物資源研究收藏中心等,共同推動全球生物資源的保藏和研究工作。

零下20℃冰箱一般不適合用于長期保存 ATCC 菌株。雖然 - 20℃冰箱可用于短期保存某些菌株,但長期保存可能會導(dǎo)致菌株活力下降、基因突變等問題,原因如下:
冰晶損傷:在 - 20℃條件下,菌株細(xì)胞內(nèi)的水分仍有可能形成較大的冰晶,這些冰晶會破壞細(xì)胞的結(jié)構(gòu),如細(xì)胞膜、細(xì)胞器等,從而影響菌株的活力和生理特性。隨著時間的推移,這種損傷會逐漸積累,導(dǎo)致菌株的存活率降低,甚至可能使菌株失去某些關(guān)鍵的生物學(xué)功能。
生化反應(yīng)仍可發(fā)生:-20℃并不能完全抑制所有的生化反應(yīng)。菌株細(xì)胞內(nèi)的一些酶仍然可能具有一定的活性,從而引發(fā)細(xì)胞內(nèi)的代謝反應(yīng)。這些反應(yīng)可能會消耗細(xì)胞內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì),產(chǎn)生一些對細(xì)胞有害的代謝產(chǎn)物,進(jìn)而影響菌株的長期生存。
穩(wěn)定性問題:-20℃冰箱的溫度穩(wěn)定性相對較差,容易受到外界環(huán)境因素的影響,如冰箱門的開關(guān)、電源波動等。溫度的波動可能會導(dǎo)致菌株經(jīng)歷反復(fù)的凍融過程,即使是微小的溫度變化也可能對菌株造成損害,進(jìn)一步降低菌株的存活率和穩(wěn)定性。
相比之下,-80℃冰箱或液氮罐等低溫保存條件能夠更好地抑制冰晶形成和生化反應(yīng),提供更穩(wěn)定的保存環(huán)境,更適合 ATCC 菌株的長期保存。

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