PCR實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)常識(shí)

PCR實(shí)驗(yàn)室也稱為基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于擴(kuò)增特定的DNA的片段，可視為在體外進(jìn)行特殊的DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，可以快速掌握患者體內(nèi)的雜質(zhì)含量，其精度高達(dá)納米級(jí)。下面我們就簡單介紹一下PCR實(shí)驗(yàn)室的建立。

1、建立樣品制備區(qū)

該區(qū)域?qū)ｉT用于樣品制備。制備和處理核酸提取試劑時(shí)的注意事項(xiàng)：

(1)PCR產(chǎn)物和待擴(kuò)增序列的DNA克隆不可在該房間內(nèi)操作。

(2)將組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣本帶入PCR實(shí)驗(yàn)室的制樣室進(jìn)行處理，根據(jù)應(yīng)用需要提取DNA或RNA。

(3)用于樣品處理的工具不可作為普通的分子克隆工具，也不可用于操作靶序列。

(4)處理DNA樣本時(shí)應(yīng)使用特殊保護(hù)或正壓活塞移液器，以避免在樣本吸取過程當(dāng)中留下氣溶膠。

(5)大容量樣品應(yīng)使用單獨(dú)包裝的一次性移液器移液。

(6)管子開封前應(yīng)進(jìn)行短暫離心，以減少氣溶膠的產(chǎn)生，不得強(qiáng)行塌陷，以免產(chǎn)生氣溶膠。

(7)在PCR實(shí)驗(yàn)室中始終穿戴實(shí)驗(yàn)室外套和手套。手套應(yīng)該經(jīng)常更換，尤其是在提取過程的每個(gè)步驟之間。實(shí)驗(yàn)服應(yīng)專門用于樣品制備室并經(jīng)常清洗。

2、樣品制備和RNA-PCR的一個(gè)額外步驟是RNA-PCR需要額外的樣品操作，這增加了樣品之間污染的機(jī)會(huì)。為了避免這個(gè)問題，可以在PCR實(shí)驗(yàn)室的樣品制備區(qū)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄步驟。

3、設(shè)立PCR實(shí)驗(yàn)室前區(qū)

該區(qū)域?qū)ｉT用于準(zhǔn)備各種反應(yīng)。PCR實(shí)驗(yàn)室前部區(qū)域需要保持清理，沒有克隆和樣品制備造成的污染。PCR實(shí)驗(yàn)室前區(qū)需要試劑和準(zhǔn)備工作，尤其是前區(qū)PCR區(qū)專用的正壓活塞移液器。